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恶性肿瘤相关的染色体畸变
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通常,去美国看病后培养的细胞在通过低渗溶液,处理后置入固定液中固定,随后被采集。经典的固定液为甲醇:冰乙酸=3:1,固定液将获得的细胞悬液,用吸管滴到玻璃片上,这一关键性操作步骤受环境条件(如温度和湿度)、样本的细胞性质和技术人员的经验影响。
综上所述,不同的研究(针对体细胞或针对肿瘤)和不同组织来源的细胞遗传学分析,都需要有针对性的处理,从而获得更多处于有丝分裂中期的目的细胞。这在癌症研究中是很关键的,因为恶性肿瘤与胚系基因异常不同,胚系基因异常会出现在身体的每一个细胞中。恶性肿瘤相关的染色体畸变,仅仅存在于病变组织中,甚至在白血病这类肿瘤中,仅仅存在于某一个特定的细胞系中。
在成熟细胞来源的淋巴造血系统恶性肿瘤中(如成熟B细胞和浆细胞),这些细胞可能不会活跃地分裂,培养时可能需要加人促细胞分裂剂,来刺激这些细胞加速分裂。去美国看病研究表明,在G显带染色体核型分析中,添加DS:P30磷酸胞苷酰寡脱氧苷酸(CpG-ODN),并联合白介素-2(IL-2),可刺激慢性淋巴细胞性白血病细胞,增加异常染色体核型的检出。
将制备好的玻片标本放入烤箱加热数小时以使其熟化,并使用蛋白水解酶如胰蛋白酶或胰液处理,然后放入Giemsa缓冲染液中染色,终产生具有一系列明暗相间条纹(G显带)特征的22对常染色体和1对性染色体。
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